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HEPES解離液

簡要描述:

用途:分離植物組織細胞核

更新時間:2025-05-13

細胞核是一個功能單位,完整的保存了遺傳物質,并指導RNA的合成。RNA是蛋白質及其他細胞組分合成所必須的。在大多數細胞類型中,由于核被膜與內質網的連續(xù)性以及細胞核表面與細胞骨架之間的連接等原因,細胞核是被固定于細胞中的。流式細胞術是一種快速、準確、高效的測定和分析細胞DNA含量的方法,近年來已廣泛應用于植物研究中,如細胞周期分析、植物倍性鑒定、染色體分揀、細胞核DNA含量測定、生殖途徑鑒定、DNA變異分析、遺傳穩(wěn)定性分析和體胚發(fā)生分析等。只通過物理方法即切碎葉片往往不能獲取大量完整的細胞核,還需要加入一些特定成分的緩沖液,使植物細胞破損,分散細胞器,進而解離出細胞核,為后續(xù)的核DNA提取和DNA含量分析做準備。流式細胞術測定的生物細胞必須處于單細胞懸液狀態(tài),制備優(yōu)質的細胞核懸液的關鍵在于選擇合適的細胞核分離緩沖液。不同植物的組織結構和化學成分存在較大差異,使用細胞核分離緩沖液的效果不同,而且目前沒有一種普遍適用的細胞核分離緩沖液,因此需要嘗試不同的緩沖液,甚至改進其成分,以獲得的細胞核分離效果。

細胞核分離緩沖液(Nuclear Separation Buffer,NSB)又稱細胞核隔離緩沖液(Nuclear Isolation BufferNIB),也稱解離緩沖液(Dissociation Buffer),可以將細胞核跟細胞膜、內質網、細胞骨架等胞內成分分離開來。目前常用的解離液有Galbraith、Tris-MgCl2HEPES、WPB、LB01、mGb、Marie、GPB、OTTO和Marie等,各種解離液成分和濃度各不相同,不同的植物樣品需要選擇相適應的解離液,HEPES解離液主要由HEPES、、、DTT、曲拉通等組成。該試劑僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。


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